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兔外周血NK细胞分离液试剂盒
探针法基因分型预混试剂 TIANtough Ge
细胞周期与凋亡检测试剂盒
[VIP第1年] 指数:2
通过深圳市市场监督管理局认证 
人脐带间充质干细胞培
人脂肪间充质干细胞培
人间充质干细胞无动物
人骨髓间充质干细胞无| 货号： | BW120014 |
| 保存条件： | -20度冻存 |
| CAS号： | BW120014 |
| 供应商： | Biowit |
| 数量： | 1瓶 |
| 保质期： | 1年 |
| 规格： | 500ml |
RPMI1640完全培养基
★产品货号
BW120014
★产品内容
| 名称 | 规格 | 保质期 | 贮藏条件 | 运输 |
| RPMI1640 | 500ml | 12个月 | 2-8℃避光保存 | 冰袋运输 |
| 胎牛血清（FBS） | 25ml | 60个月 | -20℃避光保存 | |
| 青霉素/链霉素溶液(P/S) | 5ml | 12个月 | -20℃避光保存 |
★ 使用注意事项
1.在配制完全培养基前，请把胎牛血清（FBS）、青霉素-链霉素(P/S)放到2-8℃冰箱过夜解冻。
2.在使用完全培养基前，需要把培养基放到37℃恒温水浴中预热，注意温度不要超过37℃。
3.请把配制好的完全培养基放在4℃冰箱避光保存，并尽量在一个月内使用完。避免反复冻融，若培养基要分几次使用，请将胎牛血清（FBS）、青霉素-链霉素(P/S)解冻按用量分装后保存。
★ 产品用于
仅供研究使用。不适用于人或动物体外诊断与治疗。
★ 培养条件
37℃，5% CO2，无菌恒温培养。
★ 相关操作
细胞复苏
1.把完全培养基放入37°C水浴中预热；
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续孵育细胞）；
3.在超净台中加入5ml的完全培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清，加入5ml的完全培养基重悬细胞，转移到T-25细胞培养瓶中（带滤芯）；
5.将培养瓶置于37℃，5% CO2的无菌培养箱中培养；
6.第二天，用新鲜的完全培养基给细胞换液。
细胞传代培养
1.在显微镜下观察细胞，当细胞融合度超过80%时，即可传代培养；
2.37℃水浴预热培养基；
3.在超净台中，弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞；
4.在显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，即可加入5ml完全培养基终止消化；
5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散；
6.将细胞转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
7.弃上清，加入15-20ml的完全培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例接种到T-25细胞培养瓶中（确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间），细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶），混匀细胞悬液，确保细胞均匀分布；
8.将培养瓶置于37°C，5% CO2的无菌培养箱中培养；
9.每两天用新鲜、预热的完全培养基进行换液。
细胞冻存
细胞冻存可用百恩维的“无DMSO无动物源细胞冻存液”，具体操作如下。
1. 细胞消化和计数，用胰酶对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数；
2. 1000rpm离心5分钟，去掉上清；
3. 根据细胞计数的情况，加入适量的冻存液，使细胞密度在1×106/ml左右（或根据自己希望达到的细胞密度）；
4. 轻轻地重悬细胞（务必重悬均匀），将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖；
5. 将冻存管放入程序降温冻存盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃；
6. 第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。
注：如客户用自己配制的冻存液冻存细胞，请避免用甘油作为保护剂。
温馨提示：不可用于临床治疗。
