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重组蛋白A/G预装柱/填料

产品价格: ¥950.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国广东广州市
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-19 01:30:07
浏览次数:
43
企业信息

产品详情

品牌名称:
JET
货号: PAG000001
重组蛋白A/G预装柱/填料
技术指标每毫升rProtein A/G结合35~50mg人血清IgG38-51mg兔IgG /ml填料
         5.5-18.5mg鼠血清IgG/ml填料4.5-17.8mg鼠腹水IgG/ml填料
 
  • 产品简介
通过基因重组技术,将蛋白A与蛋白G基因重组于同一质粒载体中,并在大肠杆菌中进行表达,得到分子量为50.5KDa的可溶性蛋白A/G。该可溶性蛋白A/G具有四个IgG结合位点,来自于蛋白A;和两个IgG的结合位点,来自于蛋白G。因具有上述特性,使得基因工程重组蛋白A/G具有广泛的IgG的结合能力,对各种哺乳类动物的IgG都能结合,使得该产品在IgG的诊断和纯化中具有十分广泛的用途。
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术,将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化,使得单位体积中结合更多蛋白A/G,产品最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白A或蛋白G、蛋白A/G偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化,或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。
  • 产品技术指标
    rec-Protein A/G per Sepharose 4FF 比值:4.0-4.5mg rec-Protein A/G per ml Sepharose 4FF
    rec-Protein AG分子量:50.5 KDa
 每分子rec-Protein AG可结合IgG位点数:6个(4个来自于蛋白A,2个来自于蛋白G)
    rec-Protein AG可结合白蛋白位点数:无
    线性流速:300-500 cm/h
耐压指数:≤0.3 MPa(填料)
  • 注意事项
请在实验前仔细阅读本rProtein A预装柱使用说明。同时,将所要的所有试剂、耗材拿出置于室温,恢复至室温使用。
  • 产品保存
产品储存于2-8℃,保质期两年。
  • rProtein A/G-Sepharose 4FF纯化IgG抗体步骤
以下方法适用于从血清或腹水中纯化IgG抗体,不同来源的IgG与rProteinA/ G的结合能力不同,具体情况请参考表1。
1. 将血清或腹水样品(推荐上样量2 mL样品/mL柱)装入截留分子量3.5 KDa透析带中,于4 ℃冰箱中对1× PBS(pH 7.4)透析过夜;
2. 将rProtein A/G-Sepharose 4FF装柱固定好,用10倍柱体积1× PBS(pH 7.4)平衡层析柱,建议流速为1 mL/min;
3. 将透析好的样品从层析柱上端加入,建议流速为1 mL/min,为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样,重复2遍(或者是将样品1次性加入层析柱后置于摇床上,轻轻摇动,结合30 min);
4. 样品结合后,用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱,建议流速为1 mL/min,勿让层析柱滴干;
5. 洗脱IgG,向层析柱上端加入洗脱液(100 mM甘氨酸,pH 2.7),用预先加有100 μL中和缓冲液(1M Tris,pH 9.0)的4 mL Ep管接收,2 mL /管,共收集10倍柱体积,进行10 % SDS-PAGE电泳,确定IgG样品所在管,回收样品。
6. 加入5倍柱体积再生缓冲液(100 mM甘氨酸,pH 2.0),再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。 向层析柱加入10倍柱体积, 20% Ethanol,于4~8 ℃冰箱。

       
表1 rProtein A/G 与Ig结合能力情况
IgG类型 Protein A Protein G IgG类型 Protein A Protein G
人 IgG1 ++++ ++++ 大鼠 IgG2b - ++
人 IgG2 ++++ ++++ 大鼠 IgG2c + ++
人IgG3 - ++++ 大鼠 IgM +/- -
人IgG4 ++++ ++++ 兔 Ig ++++ +++
人IgA ++ - 鸡 Ig - +
人n IgD ++ - 仓鼠 Ig + ++
人IgE ++ - 豚鼠 Ig ++++ ++
人 IgM ++ - 牛 Ig ++ ++++
小鼠 IgG1 + ++++ ++ ++++
小鼠 IgG2a ++++ ++++ 奶牛 ++ ++++
小鼠 IgG2b +++ +++ +++ +++
小鼠 IgG3 ++ +++ 绵羊 +/- ++
小鼠 IgM +/- - 山羊 - ++
大鼠 IgG1 - +      
大鼠 IgG2a - ++++      
2 rProtein A/G预装柱系列产品参数
特性 rProtein A/G 特性 rProtein A
柱体积规格 1mL,5mL 填料稳定性 >20纯化周期
基质组成 4%高交联度琼脂糖 pH稳定性 pH 2~11
基质平均粒径 90μm 推荐工作pH范围 pH 3~10
功能基团 rProtein A/G:50.5kDa;
IgG结合位点:6个
推荐在位清洗pH范围 pH 2~11
配基密度 ≈3mg rProtein A/mL 基质 工作温度 4~40℃
结合能力 35-50mg人IgG/mL填料 运输条件 20%乙醇浸泡,室温运输
推荐流速 30~150cm/mL 贮藏条件 20%乙醇条件下,
4~8℃保存
 
重组蛋白A/G预装柱
目录号 规格(ml) 备注说明
PAG000001 1 手动
PAG000005 5 手动
PAG100001 1 自动
PAG100005 5 自动
 
重组蛋白A/G填料
目录号 规格(ml)
PAG001005 5
PAG001025 25
PAG001100 100
温馨提示:不可用于临床治疗。

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