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His标签单抗又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，用小鼠制备，HIS可被镍柱吸附，用于纯化重组蛋白。...
His标签单抗又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，用小鼠制备，HIS可被镍柱吸附，用于纯化重组蛋白。
中文名
His标签单抗
外文名
anti-6*His tag monoclonal antibody
又叫
6×His标签单抗
His标签单抗，又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，英文全称为anti-6*His tag monoclonal antibody，因为制备单抗的实验动物多为小鼠，所以小鼠来源的His标签抗体英文全称为Mouse anti-6*His tag monoclonal antibody。 目前市场上用到的His标签单抗基本都是用小鼠制备的，尚未有商品化的兔源His标签单抗。
以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗叫His标签鼠单抗。 其制备方法通常是这样的：人工合成6*His多肽，即氨基酸序列为HHHHHH的多肽，必要时在末端添加偶联载体用到的特殊氨基酸。合成好此多肽后，通过化学方法将此多肽与载体蛋白偶联（如KLH、BSA、OVA等），偶联完成后，再用偶联好的全抗原免疫实验小鼠，免疫结束后杀死免疫好的小鼠，无菌条件下取脾脏，与骨髓瘤细胞进行融合，用ELISA或者其它手段进行筛选出阳性的克隆，筛选到的细胞经过克隆化后即形成稳定的细胞株，将此细胞株进行体外培养或小鼠体内诱生腹水形成，再从培养基或者腹水中纯化即可得到His标签鼠单抗，再用Western blot或其它手段进行鉴定即可。[1] 目前世界上有很多公司都提供商品化的His标签单抗，右图是Proteintech Group的His标签单抗（产品编号66005-1-Ig）的Western blot结果，可见在曝光时间为1min的情况下，抗体稀释16万倍仍可检测到很强信号。 [2]
Proteintech His标签单抗质检数据
His标签是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签，其序列为六个组氨酸HHHHHH， 其特点是分子量小，基本不改变蛋白质的生物结构，不改变蛋白质的溶解性，更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便，根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理，人们可以利金属离子亲和层析技术纯化带有His标签的蛋白，即将含有目的蛋白的裂解液通过固定的二价金属离子（通常是二价Ni离子）填料，带有6*his标签的蛋白质即与填料结合，其它蛋白不与填料结合，最后再用高浓度的咪唑即可将目的蛋白洗脱下来。 [3]
His标签单抗可以用来鉴定His标签的蛋白质的表达情况（如目的蛋白的相对表达量、分子量）、在细胞中的定位以及其它特性。
参考资料
1.J.E.科学根，D.H.马古利斯．精编免疫学实验指南．北京：科学出版社，2009：18-33
2.His tag antibody ．Proteintech[引用日期2012-06-28]
3.Polyhistidine-tag ．Wikipedia[引用日期2012-06-28]
