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1、His•Tag™ 单克隆抗体
His•Tag® 单克隆抗体是小鼠来源的单抗(IgG1),与许多Novagen的表达载体或其它商品化的表达载体上的组氨酸标签序列发生专一反应。该抗体识别连续5个组氨酸残基,与相邻氨基酸序列无关。这个反应的亲和力非常高 (Kd = 5 x 10-8 to 1 x 10-9 M),采用抗体浓度为 0.1-0.2 μg/ml,即可非常特异而灵敏地检测His•Tag融合蛋白。His•Tag单抗可以与N-端,C-端和序列内部的 His•Tag序列反应。这种抗体也可以用来检测 Perfect Protein™ 和 Trail Mix™ Western Markers条带,使Western blots反应的内参能被非常方便地显示出来。为了使Western blotting的背景更干净,推荐使用溶于碱溶液的酪蛋白(货号70955-3)作为阻断剂。分别提供3μg 小包装及100 μg大包装,后者提供的高纯度抗体足够用于配制1000 ml工作液。
2、GST•Tag™ 单克隆抗体
GST•Tag™单克隆抗体为小鼠单克隆抗体 (IgG1),对26KDa的GST结构域(Schistosoma Japonicum)具高亲和性。为高纯度抗体,可用于检测由pET-41、pET-42或其它GST编码载体表达的GST•Tag融合蛋白。50 mg包装提供的纯化抗体足够用于50次Western blot (10cm×10cm)。
3、Perfect Protein™分子量标准
Perfect Protein™分子量标准为新颖的具有方便间隔和确定大小的一套蛋白。大小精确、间隔均匀。用于SDS-PAGE凝胶电泳,Perfect Protein分子量标准为大小精确的重组蛋白,可高度准确地确定未知样品大小。与许多常规分子量标准(如卵白蛋白,牛血清白蛋白等)不同,Perfect Protein分子量标准不含引起不规则迁移、异质性模糊条带或大小估计不准的寡糖。Perfect Protein分子量标准每个条带的已知质量也可用于估计样品蛋白浓度。该分子量标准优化用于考马斯亮蓝染色,但也可使用其它凝胶染色方法(如银染,荧光染料等)。
Perfect Protein分子量标准中每个蛋白都带有S.Tag™多肽,使得该分子量标准可用作任何Western杂交的高度准确内部标准,只要简单地在二抗或链亲和素孵育过程中加入S-蛋白AP结合物或S-蛋白HRP结合物。对于Western杂交,我们推荐使用Perfect Protein Western分子量标准,它配置了方便的浓度并可在标准杂交过程中最优化地转移最小和最大条带。
Perfect Protein分子量标准(15-150kDa)包括的蛋白大小为15,25,35,50,75,100和150 kDa。每小瓶含有400mg蛋白(每条带为50mg,除了用作2X参照的50 kDa条带为100mg)。
Perfect Protein分子量标准(10-225kDa)包括上述蛋白大小和两个额外蛋白,10 kDa和225 kDa,用于要求更广大小范围的应用。每小瓶含有500mg蛋白(每条带为50mg,除了用作2X参照的50 kDa条带为100mg)。
4、Trail Mix™蛋白分子量标准
Trail Mix™蛋白分子量标准为补充了一组三个预染指示蛋白的Novagen Perfect Protein分子量标准,可在电泳过程中直接看到蛋白迁移。与其它整个梯子预染的分子量标准不同,Trail Mix只用三个参考条带(100、16和15kDa)确认蛋白迁移、分离和指示凝胶方向。预染经常导致条带加宽或影响迁移,并降低迁移率和分子量确定的精确性。Perfect Protein分子量标准的泳动或条带清晰不受Trail Mix预染条带的影响。分子量标准为大小精确的重组蛋白,可高度准确地确定未知样品大小。与许多常规分子量标准(如卵白蛋白,牛血清白蛋白等)不同,Perfect Protein分子量标准不含引起不规则迁移、异质性模糊条带或大小估计不准的寡糖。Perfect Protein分子量标准每个条带的已知质量也可用于估计样品蛋白浓度。
使用考马斯亮蓝染色时,出现10条带,10 kDa-225 kDa。50 kDa条带含量高于其它条带,是除了预染三条带以外的另一个标志。每个蛋白都含有His.Tag序列,可以使用His.Tag抗体进行Western blot检测。