1. MaSuRCA 简介
MaSuRCA(Maryland Super Read Cabog Assembler)基因组组装软件集合了 de Bruijn 和 Overlap-Layout-Consensus 的优点。
文献：Zimin A V, Marçais G, Puiu D, et al. The MaSuRCA genome assembler[J]. Bioinformatics, 2013, 29(21): 2669-2677.
2. MaSuRCA 下载和安装
1 2 3 4 | $ wget wget ftp://ftp.genome.umd.edu/pub/MaSuRCA/MaSuRCA-2.2.1.tar.gz $ tar zxf MaSuRCA-2.2.1.tar.gz -C /opt/biosoft $ cd /opt/biosoft/MaSuRCA-2.2.1 $ ./install.sh |
3. MaSuRCA 使用
3.1 配置文件准备
将模板配置文件 “/opt/biosoft/MaSuRCA-2.2.1/sr_config_example.txt” 拷贝到当前工作目录，并修改之。此配置文件含有输入文件和参数 的一些信息。内容如下：
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 | # 测序数据的信息。分为 3 种类型：PE JUMP OTHER。每种类型的数据后接 5 列：1）2 个字符的前缀；2）平均插入片段长度；3）插入片段长度标准差；4）fastq(.gz)格式的 reads1; 5）fastq(.gz)格式的 reads2。如果有 jump 数据是 FR 类型，则，则使用 JUMP，但是平均插入片段长度为负数。其它的数据，则必须要转换成 Celera 兼容的 .frg 文件。 DATA PE= p1 180 20 180_1.fastq 180_2.fastq PE= p2 500 50 500_1.fastq 500_2.fastq JUMP= j1 2000 200 2000_1.fastq 2000_2.fastq JUMP= j2 5000 500 5000_1.fastq 5000_2.fastq OTHER= file.frg END PARAMETERS # 设置 k-mer size，大小为 25~101，或者为 auto，表示自动计算最优值。 GRAPH_KMER_SIZE=auto # 如果仅分析 Illumina 数据，则值为 1；如果有 1x 及以上的 454 数据，则设置为 0。 USE_LINKING_MATES=1 # 如果 jumping library 的数据过多，可能会 confuse the assembler，设置此值为 60，则仅使用 60x 左右的 jumping 数据用于基因组组 装。对于细菌基因组，一般设置为 60。如果基因组较大，则设置此值大些。对于一些较大的真核基因组，可以大至 1000。 LIMIT_JUMP_COVERAGE = 60 # Celera Assembler 的参数。如果是 mammals 的基因组，cgwErrorRate的值不能高于 0.15。 CA_PARAMETERS = ovlMerSize=30 cgwErrorRate=0.25 ovlMemory=4GB # 舍弃频数低于此值的 k-mer。如果覆盖度大于 100，可以设置此值为 2。 KMER_COUNT_THRESHOLD = 1 # 设置使用的线程数。 NUM_THREADS= $NUM_THREADS # 设置 jellyfish 的 hash size。此值可以设置为 "基因组大小+reads的数目"。 JF_SIZE=100000000 # 设置是否 trim long reads 的 3' homopolymers（e.g. GGGGGGG)。适合于高 GC 含量的基因组。 DO_HOMOPOLYMER_TRIM=0 END |
3.2 运行 masurca 和 assemble.sh 进行基因组组装
运行程序 masurca，生成 assemble.sh; 然后运行 assemble.sh 进行组装。
1 2 | $ /opt/biosoft/MaSuRCA-2.2.1/bin/masurca config.txt $ ./assemble.sh |
3.3 运行中断后继续运行
由于程序出错，或手动终止后，可以终止步骤所生成的文件，在继续运行 masurca ，生成含有后续步骤的 assemble.sh，再继续运行程序。
4. 结果文件
最终的结果文件为 CA/10-gapclose/genome.ctg.fasta 。
原文来自：http://www.chenlianfu.com/?p=2107
