番茄酱中纽甜的检测(GB 5009.247-2016)
纽甜的甜味与阿斯巴甜相近,无苦味及其它后味,纽甜的甜度为蔗糖的8000-10000倍,即在5%的甜度时为蔗糖的8000倍,在2%的甜度时可达蔗糖的10000倍。根据GB2760-2011食品添加剂卫生标准,纽甜的使用范围为各类食品饮料,使用量为按生产需要适量使用。
作为一种功能性甜味剂,纽甜对人体健康无不良影响,起有益的调节或促进作用。早在1998年12月纽甜作为食品甜味剂低温的申请已在美国提出。已于2002年7月9日通过美国FDA食品添加物审核允许应用在所有食品及饮料。欧盟于2010年1月12日正式批准其应用,其指定代码为E961。中华人民共和国卫生部2003年第4号公告也正式批准纽甜为新的食品添加剂品种,适用各类食品生产。
本实验主要针对番茄酱中纽甜的测定。
参考标准:《GB 5009.247-2016食品安全国家标准 食品中纽甜的测定》
实验步骤:混合提取液:分别吸取0.8mL甲酸和2.5mL三乙胺,加水定容到1000mL,pH约4.5
离子对试剂缓冲液:称取2.00g辛烷磺酸钠,用500mL水溶解,加入1.0mL磷酸,加水定容到1000mL
01 样品提取:
称取5g番茄酱试样于50mL离心管中,加入15mL混合提取液,涡旋10min,超声30min,8000r/min离心3min,收集上清液。
02 样品净化:
Welchrom® C18E, 500mg/6mL
活化:甲醇6mL,水6mL。
上样:上清液全部上样,以1滴/s的速度通过C18柱,弃流出液。
淋洗:先用5mL混合提取液淋洗,再用5mL水淋洗,弃流出液。
洗脱:5mL甲醇洗脱至鸡心瓶中,浓缩近干,用混合提取液定容到2mL,过0.45μm滤膜待HPLC分析。
03 仪器条件:
HPLC条件
色谱柱:Ultimate AQ-C18 4.6×150mm,5μm
流动相:A:乙腈 B:离子对试剂缓冲溶液 等度洗脱:A:B(35:65)
柱温:35℃
流速:0.8mL/min
检测波长:218nm
仪器型号:Waters2695+UV2487
进样体积:10μL
04 实验图谱及结果
图1纽甜样品加标1mg/kg液相色谱图
图2纽甜样品加标2mg/kg液相色谱色谱图
表1 纽甜加标回收实验结果(n=10)
由表1可知,采用月旭C18固相萃取柱结合液相色谱法检测纽甜,加标量为1.0mg/kg和2.0mg/kg的样品进行了检测,回收率在82.31%~96.34%,能够满足检测要求。由图1可看出经C18固相萃取柱净化,采用月旭Ultimate AQ-C18色谱柱检测峰形良好,保留时间稳定。
05 实际样品检测:
为了保证番茄酱样品的代表性,从多家超市以及菜场选择具有代表性的10个番茄酱样品进行检测,结果均为未检出。06 结论
本实验建立了纽甜检测的HPLC检测方法,对于加标量为1.0和2.0mg/kg的样品进行了检测,回收率在81.22%~105.34%,固相萃取柱方法稳定并且色谱柱重现性良好,说明本方法能够用于检测食品中的纽甜的含量。
07 订购指南