蛋白质、酶和核酸是存在于一切生物体中的非常重要的生物大分子；蛋白质是生物功能的执行者，担负着生物催化、物质运输、运动、防御、调控及记忆、识别等多种生物功能；核酸是遗传信息的携带者，在生物体中指导各种蛋白质的合成。生物大分子的分离纯化方法很多，主要是根据分子间特异性的差异，如分子大小、溶解度、电荷等建立起来的。
在做酶的分离纯化和核酸分离纯化实验时有哪些注意事项？
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酶与核酸分离纯化的时候，需要注意的地方是不同的。酶类首先要注意的就是温度，很多蛋白质都是热敏感性的，你必须要注意低温操作，所有的步骤最好是在4度的环境下进行。接着要注意的就是避免使用一些会造成蛋白质变性的试剂，比如说重金属盐，有机试剂。严格意义上来说，要提取活性酶，任何可能使蛋白质沉淀的试剂和方法都要避免使用。最好就是直接在液体环境下进行，比较理想的方法就是色谱柱层析。然后，实际上为了防止蛋白质在提取过程中被释放的内源性蛋白酶（木瓜蛋白酶，枯草蛋白酶等等）降解蛋白质，还需要在提取环境中加入适当的蛋白酶抑制剂。对于核酸，DNA和RNA分离的时候要求也不同。对于DNA，这是一种非常稳定的物质，一般来说只要防止内源性的对于核酸，DNA和RNA分离的时候要求也不同。对于DNA，这是一种非常稳定的物质，一般来说只要防止内源性的DNA酶降解，目前发现的DNA酶都需要二价金属离子辅助的（如镁离子，钙离子），所以加入二价金属离子螯合剂EDTA就可以抑制DNA酶的活性。DNA提取纯化过程中最主要的问题就是长链DNA的物理损伤，所以操作过程中一定要轻柔，忌剧烈振荡。对于RNA分子，RNA分子是一类非常不稳定的物质。而且对RNA酶特别敏感，而RNA酶是一种无处不在的酶，灰尘与空气以及人体的唾液和皮肤都有RNA酶的存在，而且RNA酶是一种非常稳定的酶，强酸强碱以及一般高温高压灭菌程序都不能使其彻底变性，而且它并不需要任何辅助因子就能发挥酶活性。所以在提取过程中，所有器材都需要灭RNA酶处理（0.1%DEPC水浸泡过夜，再灭菌处理）。整个提取过程中戴手套操作，并且手套要经常换。避免在实验过程中说话。
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