楼主 | 收藏 | 举报 2008-08-21 16:15   浏览:184   回复:5

【求助】蛋白质不变性聚丙烯酰胺凝胶电泳7.5%的分离胶和浓缩胶的配方

:)谁知道蛋白质不变性聚丙烯酰胺凝胶电泳7.5%的分离胶和浓缩胶的配方啊,急用!
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沙发 | 回复 | 举报 2008-08-27 15:37
3.375ml 水+1.5ml 30%丙烯酰胺+1.125ml 2M Tris 8.8+30ul AP(APS?)+6ul TEMED=7.5%分离胶

2.130ml 水+495ul 30%丙烯酰胺+375ul 1M Tris 6.8+30ul AP+7.5ul TEMED=5%浓缩胶

我一直用的这个配方。
藤椅 | 回复 | 举报 2008-08-29 02:48
好久了,除了没有SDS,上样缓冲液中没有巯基乙醇,SDS其它没什么吧.
板凳 | 回复 | 举报 2008-08-29 08:44
这个问题,还请牛人来解答吧……

我新做这个实验,师姐配的上样buffer够我用一学年的…………

自己没配过……

反正,电泳过程是最大程度上保证蛋白的原型,不让其发生解聚或变性,所以不仅全程没有SDS和β-巯基乙醇,整个电泳的过程中还要控制产生的热量……
马扎 | 回复 | 举报 2015-03-18 09:15
你好,那电泳液的配方是什么?
地板 | 回复 | 举报 2018-03-15 19:55

这是我们书上的配制方法   但是书上的上样缓冲液还是加了β-巯基乙醇,所以上样缓冲液怎么处理我还不知道,如果你知道了可以麻烦告知一下吗

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