楼主 | 收藏 | 举报 2015-10-23 21:52   浏览:202   回复:5

【求助】如何区分相近大小的条带 跪谢!

各位大神好!!!小弟最近遇到一个问题,我把融合的基因与T载相连,(融合基因2200bp左右)但在双酶切准备连接表达载体的时候,总出现问题,主要就是跑胶的时候不能将目的基因与T载分开,导致我根本不能将目的基因回收!!!请问有经验的大神,我该怎么办,用多少浓度的琼脂糖????还有电压多久?????多长时间能分开????跪谢!!!小弟明年就毕业了 ,还望各位鼎力相助!!!
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沙发 | 回复 | 举报 2015-10-25 00:41
How big the T vector is? Do you have any gel picture?
藤椅 | 回复 | 举报 2015-10-26 09:34
T载用的pmd19-T 大概2700左右 ,我用的1%的胶跑了大概40分钟 还是分不开 感觉有分开的趋势 但是很模糊
板凳 | 回复 | 举报 2015-10-26 16:03
Try to make a 1% long gel and load each well with 0.2-0.4 ug of digested plasmid for 10 wells or 15 wells. Run gel at 20 voltage and 30 mA at room temperature for 12-16 hours in 1 x TAE.
马扎 | 回复 | 举报 2015-10-26 20:51
Thank U! I'll try !
地板 | 回复 | 举报 2018-03-16 19:17

请问你区分开了没?如何区分?

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