楼主 | 收藏 | 举报 2018-02-28 10:44   浏览:220   回复:10

细菌鞭毛缺失的原因

 

大家好,我是一名研二学生,想咨询一下关于鞭毛染色或者鞭毛相关的问题。现在我有一株沙门氏菌菌电镜观察无鞭毛,课题想做的就是鞭毛没法正常组装的原因。提取胞外蛋白,打质谱情况来看,鞭毛丝和鞭毛钩蛋白都没有分泌出来(暂时不确定胞内表达是否正常,正在过表达验证),基因和启动子无突变,现在想了解class 2调控的基体是否正常组装,我想知道有没有针对HBB染色的,便于知道HBB有没有组装,以进行下一步实验。不知道各位老师可否赐教,万分感谢。为了能够及时联系,我的微信号是************,期待您的回复。    

 

打赏
沙发 | 回复 | 举报 2018-02-28 14:09

要多确认,在样品处理过程中,可能鞭毛会丢失

藤椅 | 回复 | 举报 2018-02-28 17:49
blowapc

要多确认,在样品处理过程中,可能鞭毛会丢失


没有任何处理,直接用LB摇菌,不经离心等处理,直接染色,已经做过三次电镜
板凳 | 回复 | 举报 2018-02-28 17:51
Ellian_Song

没有任何处理,直接用LB摇菌,不经离心等处理,直接染色,已经做过三次电镜

剧烈振动后再提取分泌蛋白,如果有脱落应该有鞭毛蛋白,SDS-PAGE结果以及质谱结果,相关结构蛋白都没有
马扎 | 回复 | 举报 2018-02-28 17:52
Ellian_Song

没有任何处理,直接用LB摇菌,不经离心等处理,直接染色,已经做过三次电镜

有拿几株标准菌同时做对照组
地板 | 回复 | 举报 2018-03-03 16:55

建议首先确定胞内是否表达,做一个westernblot即可

6楼 | 回复 | 举报 2018-03-05 05:21
blowapc

建议首先确定胞内是否表达,做一个westernblot即可


买了abcam公司的anti-flic抗体,没法用,文献上找到的抗体停产了,或者是国外的,特别贵
7楼 | 回复 | 举报 2018-03-05 22:10
Ellian_Song

买了abcam公司的anti-flic抗体,没法用,文献上找到的抗体停产了,或者是国外的,特别贵

自己做抗体就行,多肽抗体2周交货,非常快

8楼 | 回复 | 举报 2018-03-07 00:41
blowapc

自己做抗体就行,多肽抗体2周交货,非常快


不知道TTSS分泌系统和鞭毛分泌系统,前者是后者的基础上进化来的么?也有说同属于一个祖先
9楼 | 回复 | 举报 2018-03-09 13:00
Ellian_Song

不知道TTSS分泌系统和鞭毛分泌系统,前者是后者的基础上进化来的么?也有说同属于一个祖先

有这种说法,也有鞭毛蛋白走ttss出来的
10楼 | 回复 | 举报 2018-03-15 17:30

我们做过很多的细胞自……

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。