楼主 | 收藏 | 举报 2007-08-03 19:36   浏览:215   回复:37

【交流】微生物试验常犯错误,欢迎大家发言

:D请大家来讨论微生物试验常犯错误,给大家以参考,互相学习。有助于少犯错误,节省时间

欢迎多多发言

大家不要把微生物试验的范围想得太窄了,一切用到微生物的试验都可以说是微生物试验,例如:微生物的培养、转化、基因克隆、基金敲除、上发酵罐....都可以拿出来讨论阿
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沙发 | 回复 | 举报 2007-08-09 01:02
1 实验过程中要及时详细标清除产物和日期,实验做完以后要对以前的过度产品做个清理,以免东西积累过多,自己都搞不清楚是什么东西。
2 实验后的DNA和RNA要及时放回冰箱,以免时间长降解,特别是用水溶解的时候。
3 要及时甘油保存你鉴定出的细菌,每个细菌保存两份,存放在-80度冰箱里。
4 实验用的酶类虽然在室温下放一段时间也没什么问题,但还是要及时放回冰箱,以免活性降低。
5 要及时清理实验台面,该仍的东西及时扔掉,保持干净,整洁,有序。
6 无菌操作台用后及时清理干净,操作真菌,细菌,酵母,昆虫细胞最好不要交叉使用。
7 培养基使用的时候要注意无菌操作,移液器不要插入培养基中,之准许无菌枪头进入瓶子腔体,如培养基较少,可以倾斜瓶子,移液器取液体最好不要用到最大量程,以免吸液过猛导致与移液器接触。
8 灭好的培养基标签一定要写好,包括名称,日期,是否加抗生素,是否加抗生素非常重要,特别是在共用培养基的实验室。
9 实验用过的试剂盖子一定要盖好,以免挥发。特别是有毒的物品,如氯仿,苯酚等,用完后的瓶子及时拿出实验室。
10 带手套接触有毒物品后,要及时处理掉手套。不管是否接触过有毒物品,,不要戴着手套乱接触其他东西,如开窗等。
11 做实验过程中不要接电话,说话,考虑其他事情。特别是PCR和配溶液的时候。做PCR和配溶液的时候要把所用的试剂找全,一字排开,加完一种东西就把这种东西放到一边,可防止自己少加错东西。
12 同时作几个实验的时候一定要有定时器,防止自己忘记,特别是在煮东西,加热溶化溶液等危险操作的时候,切忌。
13 饭前,有活动前不要做实验,这时候匆匆忙忙非常容易出错,特别是作有危险的实验,更要注意。
14 作好试验记录,不管有没有结果,一定要坚持。还有点用图片,测序结果等,如果不清楚记录东西多了,就乱了,混了。这个一定要认真做好。
15 要随时写下自己的想法,因为有些想法稍纵即逝。

呵呵,就写这么多,科研中的一点体会,希望能对大家有点帮助。
藤椅 | 回复 | 举报 2007-08-06 20:31
Absolutely!
做微生物实验需要的是100%的细心,一点小小的粗心造成的结果就会很严重的,可能几天的功夫都白费了!
我提一个关于倒平板的小细节吧:怎样倒平板才能尽量少的产生冷凝水?
1.要等熔化的固体培养基温度大概被手背温度高一点(即不烫手背)的时候才开始倒。2.倒好的培养皿最好一个叠着一个,这样就让培养皿盖子的温度和培养基的温度不会相差太远,冷凝水就容易产生。
板凳 | 回复 | 举报 2007-08-07 11:02
牛肉膏、酵母膏之类的膏状物体容易粘在称量纸上,酵母粉也容易粘纸。我称量这类东西时一般先称其他成分,比如氯化钠、蛋白胨,称完后不倒掉,把这些东西在称量纸上摊平,把天平读数清零,再把容易粘纸的东西直接放在上面称。称时要小心,因为不够可以往上加,多了就不好取下来了。称完一起倒进容器内。牛肉膏、酵母膏之类的膏状物体不接触纸,当然就不会粘纸了。
如果直接在配培养基的容器内称,最好在容器内先加少量蒸馏水(量好体积),因为牛肉膏、酵母膏之类的膏状物体如果直接放进容器内,会粘在容器上不好溶解。

我的第一分,留个纪念,呵呵!
马扎 | 回复 | 举报 2007-08-03 20:33
我先说说吧 我们实验室很多人习惯把要刷的平板、研钵、吸管等先放在水池里,等一段时间再刷 但是水池里面会有人倒少量的有机溶剂(稀释后),洗电泳槽的水也倒在水池里。

我觉得 这样的话会污染平板、研钵....,如果洗不干净的话会影响微生物的培养。建议大家不要把要洗的东西放在水池里 呵呵
地板 | 回复 | 举报 2007-08-04 18:14
容易造成污染
6楼 | 回复 | 举报 2007-08-04 19:22
我在微生物试验犯的错误比较多,比如刚开始进实验室时候,无菌观念不强,结果污染过N次;后来污染解决了,本人比较懒,不做平行和梯度,结果浪费了时间,数据也不能用.现在好多了,我的体会是做试验别怕麻烦.
7楼 | 回复 | 举报 2007-08-05 07:58
呵呵 是啊 很多小细节大家不注意的话会引起大问题

还有个很多人容易忽视问题就是——设计实验的时候不做对照,等实验做完了,虽然结果很好,就是用不了,特郁闷。
8楼 | 回复 | 举报 2007-08-06 18:31
flameofstar
呵呵 是啊 很多小细节大家不注意的话会引起大问题

还有个很多人容易忽视问题就是——设计实验的时候不做对照,等实验做完了,虽然结果很好,就是用不了,特郁闷。

楼主说得太对了,做实验不仅要注意细节,还要勤于思考,记得有一次我用酸液浸泡东西,不小心竟把一个铁皮盖放了进去,当时没做过多的思考,心想也让它消消毒吧。等两天以后去洗东西时,才发现只剩下铁皮上粘的一层薄纸了。现在想想,当时真是范晕,竟然把铁皮放进了强酸…………
9楼 | 回复 | 举报 2007-08-06 18:38
很喜欢这个讨论..期待中..:):):)
10楼 | 回复 | 举报 2007-08-06 19:51
一定要按照正规的步骤来,不能自行省略。
例如做菌种复苏的时候,有选择性培养基的最好用选择性培养基,这样培养出来的大概就可以确定是目的菌了。我以前用BHI(据说是很万能的培养基)复苏的菌种,结果到了后来才发现不是我需要的,而都是杂菌,耽误了很长的时间。
培养后,还要进行生化鉴定,革兰染色及PCR鉴定物种。
选择性培养基在经过了四十八小时的培养后,抗性降低,再培养出的可能就全是杂菌了。
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