求教蛋白半衰期测定

我们细胞给药处理后1种目标蛋白降低明显，我们想知道这种蛋白是合成减少了还是降解增多了？给MG132处理过好几次之后竟然目标蛋白降低了，这不应该啊...

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沙发 | 回复 | 举报 2018-03-16 09:03

验证是否蛋白生成减少了，看下蛋白mRNA表达是否减少，如果减少证明是

蛋白生成减少

藤椅 | 回复 | 举报 2018-03-16 10:36

用chx处理，chx抑制蛋白合成，做时间梯度后，如果逐渐减少了就是降解了。一般mg132处理只有几个小时，看的是ub的水平。不知道你mg132是什么浓度处理多久

板凳 | 回复 | 举报 2018-03-16 12:34

麦克林托克
用chx处理，chx抑制蛋白合成，做时间梯度后，如果逐渐减少了就是降解了。一般mg132处理只有几个小时，看的是ub的水平。不知道你mg132是什么浓度处理多久

MG132我是1umol/L的浓度，处理了12小时，如果降解途径被抑制的话总量应该是增加的，我做出来的几次都是减少的，哎...

马扎 | 回复 | 举报 2018-03-16 12:35

yang_nj
验证是否蛋白生成减少了，看下蛋白mRNA表达是否减少，如果减少证明是
蛋白生成减少

做过PCR，确实是降解的，蛋白合成没变化

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