楼主 | 收藏 | 举报 2018-03-07 12:03   浏览:284   回复:13

请教WB

请问大神,这个条带怎么回事儿?

打赏
沙发 | 回复 | 举报 2018-03-07 12:38

抗体不特异或者是本来就有两条带,看位置是否正确

藤椅 | 回复 | 举报 2018-03-07 14:46
条带多是抗体的问题,不一定是错的,但一定是这个的原因。你的图不好看,是操作问题,不均匀。
板凳 | 回复 | 举报 2018-03-08 14:19

楼上正解,推荐一篇wb操作方面的综述吧:

https://www.labome.com/method/Western-Blot-Protocol-Troubleshootings-and-Survey-Results-on-Instruments-and-Reagents.html

马扎 | 回复 | 举报 2018-03-08 15:13

有可能抗体是多克隆抗体,目标蛋白存在亚型,如果分子量是对的,那应该没问题。背景颜色太深封闭的时间应该长一些

地板 | 回复 | 举报 2018-03-09 16:50

封闭时间太短,背景太深了

6楼 | 回复 | 举报 2018-03-09 22:53
mi_cun

封闭时间太短,背景太深了

背景深是什么原因?用软件调整也调整不好

7楼 | 回复 | 举报 2018-03-12 10:47

看着楼主的问题,觉得WB背景很深,一个是抗体封面的问题,可能封闭时间过长洗膜不充分,导致非特异性蛋白的结合。另外,抗体特异性不是很好,条带多,不清楚主带。希望对你有帮助

楼主可把Marker标注清楚,自己的分子量以及实验的条件写明,大家好帮你找问题

8楼 | 回复 | 举报 2018-03-15 21:44
foreverpang

抗体不特异或者是本来就有两条带,看位置是否正确

估计抗体特异性不好,用的Bioworld的抗体,用鼠的细胞还可以,这图是人的细胞,估计特异性不好吧

9楼 | 回复 | 举报 2018-03-15 21:46
rankaikai319

看着楼主的问题,觉得WB背景很深,一个是抗体封面的问题,可能封闭时间过长洗膜不充分,导致非特异性蛋白的结合。另外,抗体特异性不是很好,条带多,不清楚主带。希望对你有帮助

楼主可把Marker标注清楚,自己的分子量以及实验的条件写明,大家好帮你找问题

封闭了2个小时,是不是封闭时间太长了曝光的时候比较难曝,也会导致背景比较深?这个条带都是目标蛋白,没有MARKER

10楼 | 回复 | 举报 2018-03-15 21:46
mi_cun

封闭时间太短,背景太深了

封闭了2个小时...

 «上一页   1   2   下一页»   共13条/2页 
网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。