本人在做肺纤维化相关的课题,目前碰到一个问题请教各位
博来霉素造模大鼠肺纤维化,取肺组织做相关指标的qPCR,肺泡灌洗液做ELISA,比较空白组与造模组的表达量
现在得到的结果是qPCR与ELISA结果完全相反,例如TGF-β1,是公认的肺纤维化指标,在肺纤维化中应该是上调的。我做出的结果是ELISA在造模组明显上调,而qPCR却是下调,其他该上调的指标同样;而该下调的指标则是ELISA上调,qPCR下调。以TGF-β1重复了好几次qPCR,都是这样的结果。所以总的结果就是如题目所说(qPCR的溶解曲线单峰,扩增曲线也正常,有一点问题就是内参的CT值不是很稳定,18-22左右,内参选取的是GAPDH,不知道这个影响大不大)
现在一直停留在这个阶段不知该怎么办,烦请各位有空帮忙解答一下,非常感谢!