求助养脂肪干细胞的大神

我最近在养脂肪干细胞，按照文献说的取到脂肪（吸脂和皮下脂肪都有）剪成乳糜状，用PBS冲洗后，等体积1mg/mlI型胶原酶消化40min，等体积含10%胎牛血清培养基终止消化，800g离心5min，弃上清液，培养基重悬后，移入60mm培养皿培养。但是如此反复数次，得到的每次都如图，图为培养6天X200显微镜下的样子，可以看见有细胞，但是不是梭形细胞。想求助各位养脂肪干细胞的大神给看看，这到底是什么，多谢！！！

 

你这个没提出来，步骤倒是没问题。我用的类似步骤，贴壁6小时就能看到干细胞。

是因为消化的时间不够吗？

有可能，我一般消化时每10分钟吹打一次，直至完全消化。组织块弄大一点，不必剪太碎，更容易判断消化效果。消化液可以加多点，也不要拘泥于具体消化时间。

请问你有消化好以后的照片吗？可以给我看看吗？没有离心之前的

我之前没留过照片，下次分离细胞时拍照发给您。

谢谢了～

这是消化好离心前的照片

下面一张是过滤并离心后的照片。

6小时就贴壁了，好快 你用的培养基是DMEM/F12低糖的么(含10%FBS)，另，FBS是用的GIBCO进口的血清么，望帮助

培养基是的，血清不太记得了，中途也换过血清，影响不大。