收藏  |   举报 2008-11-24 15:21   关注:230   回答:3

【求助】18bp的探针可以用地高辛标记试剂盒标记上地高辛吗?...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-05 02:51
【求助】18bp的探针可以用地高辛标记试剂盒标记上地高辛吗? 急!
举报 2008-11-27 07:31
18nt,与其标,还不如直接合成DIG修饰的引物,也就500RMB左右吧,你为啥非要费老劲儿去标,试剂盒原理是随机引物结合后,利用Klenow片段延伸,在延伸过程中用dUTP-dig取代T,虽然是随机引物,但是与18nt模板结合的概率也低了点吧,就算结合上了,供你延伸的区域能有几个核苷酸?18nt上有几个T你有没有看过?这个跟标记的效率直接相关。再加上标记并不是100%的标,有可能部分产物是没标上的。上面几个因素下来,估计你后面的光排除问题花的都不止500RMB,你说为啥不直接合成DIG标记的引物呢?
举报 2008-12-01 15:46
多谢你了。问题是实验室里有地高辛标记试剂盒(试剂盒有四或者五年了),还有师哥剩的引物可以当探针,这些都是现成的,老板要我们做原位杂交,意思是利用实验室有的东西做。要花500元买探针肯定是行不通的。我们的探针是AAT GGA GTC ACC AGC AGA。实验室条件有限啊,不得不自己标记。 如果这样的序列太短不能标记的话,那我们只能让公司合成探针,然后我们自己再标记。请教你我们的探针是不是可以标记?非常感谢!
举报 2008-12-03 03:20
不行了吧,太小了。反正我这的说明书上说了,最小为100bp,但最好也不要超过500bp。
如果其大于500bp的话,可以用4bp的酶(例如hae III)来消化。
网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。