求助：Roche 地高辛标记试剂盒的转基因植物基因组DNA ...

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悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-27 07:16

求助：Roche 地高辛标记试剂盒的转基因植物基因组DNA Southern Blot步骤

clpiao

举报 2004-07-20 19:19

具体步骤可以看超作手册，我做这个有一段时间，我的经验是DNA酶切要完全，要做到这一点，可以把抽的DNA再用酚和氯仿再沉淀一次，然后零下70度无水乙醇沉淀过夜，酶切时先把除酶以外的成分加好，在4度放4小时，期间每隔15分钟混匀一次，然后加一半酶量，酶切2小时后再加其余的酶，再酶切6小时，如果超过8小时，条带一般不会太好看，另外，植物基因组酶切时的酶量是5单位每微克DNA.
祝你成功

benjibin

举报 2004-07-20 22:20

那如果是细菌基因组DNA，酶切几小时？酶量是多少呢？

hanson

举报 2004-07-22 17:29

非常感谢clpiao，
我用的是玉米的基因组DNA，Roche 的DNA 提取试剂盒提取的。酶切时为什么先将除酶外的其他成分在4度放置那么长时间？
我的email是：wuwei@dl.cn，或是您告诉我您的email，好吗？

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