重组蛋白分子量太大，110KD左右，镍柱纯化一直不成功，试了...

待解决

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重组蛋白分子量太大，110KD左右，镍柱纯化一直不成功，试了一系列咪唑梯度，每次都是杂蛋白跟着目的蛋白一起洗脱下来。甚至10mM咪唑都能把目的蛋白洗下来，目前考虑是HiS标签被包埋了。我用的pet32a载体，有两个his标签。在不重新设计添加his标签的引物的情况下，该怎么获得纯化蛋白呢？

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