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2016-07-15 07:35
这个结果是一个失败的试验 1、标准品在0-31.25 范围内根本没有梯度结果呈现。 原因:(1)试剂盒灵敏度不够高,(2)试剂盒显色系统不好 2、样本和标准品结果几乎在一样的范围内,根本就没区分度。 原因(1)试剂盒质量差,(2)试剂盒选的不够好 建议以后再做类似需要做标准曲线的实验时的步骤: step1: 只做试剂盒的标准曲线,观察试剂盒的标准曲线是否能够呈现良好的梯度趋势。良好的标准曲线范围如下: “0”浓度 OD值小于0.1, “中间浓度”OD值 介于0.500-1.000之间, “最高浓度”OD值大于1.0,最好能到1.5~2.5。 step2: 试剂盒标准曲线和样本同时做,并且附带空白孔 step3: 选择合适的标准曲线拟合方程式,进行样本浓度计算,方程式的选择取决于你的标准曲线的走势。 一般双对数方程式可以适用绝大部分的标准曲线。 欢迎咨询 |
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2016-07-10 06:59
你标准品浓度是0的时候,出来的结果,就是阴性对照,或者空白的结果,但是你标准品浓度为0时,出来的结果OD值直接就是0.2左右,说明你的试剂盒背景信号值就是0.2左右,要计算就得把所有的数据减去你的空白值后再看数据。但是不论怎么看,你这个试验的数据都是失败的,不能说明问题。 你测定的样本的结果基本上全部都是空白值。 重新按照我上边说的方法再做一次,如果标准曲线还是做不出来梯度,只能更换试剂盒 曲线拟合 多项式也可以,只要相关系数好 另外你可以把操作过程写出来,才好分析。 建议你 1、增加个步骤的反应时间,原来是30分钟的,延长到1小时 2、增加显色时间,原来是20分钟显色时间,增加到30分钟甚至更久, 但是一定注意,如果改变了实验时间,以后全部要按照同样的方式操作,否则数据没有可比性 |