链霉亲和素为什么可以提高融合率...

链霉亲和素为什么可以提高融合率

链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨酸的含量较大，而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；链霉亲和素是一种稍偏酸性（pH6.0）的蛋白质，并且不带任何糖基。在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在N端10～12和C端19-21间断裂，形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力，所以可以提高融合率。
链霉亲和素是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质，是streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。

链霉亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(svidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质。
链霉亲和素(SA)是streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结台生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。
一 、来源：AV 存在于鸡蛋清中，主要通过离子交换和分子筛方法提纯，从1L蛋清中可提取纯AV15~25mg。SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物，主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯，1L培养液中含蛋白1 0~60mg 。
二、分子量 ：一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450，而AV 的一条肽链其含128个氨基酸残基，但分子量也达15600，两者十分接近，这是因为SA 的氨基酸中，甘、丙氨基酸含量较大，且又不含任何糖基，而AV 的每条肽链含4个甘露糖，3个氨基葡糖，含糖量达lO ，故分子量相对较大。
三、比消光系数：消光系数与蛋白中Tyr含量有关， 由于SA 中Tyr的含量比AV 多，所以SA的比消光系数也较AV 为高，两者分别为E 1mg/ml=3．40和E1mg/ml=1.57。在282nm 上这两种蛋白结合生物素后并不改变其消光系数，而在233nm上，它们结合生物素后郡便其消光系数值增高，现在一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。展开