实验要做基因克隆，本人零基础，真诚求助...

实验要做基因克隆，本人零基础，真诚求助

基因做表达实验必须要克隆全长
步骤：1，RNA抽提（同RT）
2，逆转录，使用合成的oligo
3，p内参
4，使用根据已知序列设计的上游引物和提供下游引物做PCR，注意设计上游引物是退火温度与下游引物相差不大。
5，产物切胶回收，TA克隆测序

这个oligo和下游引物是我根据Takara和BD公司的manual自己设计的，经过我的使用效果很好。具体操作参照takara的3－racemanual。你先做3－race，了解熟悉下，成功后再做5－race。5－race要买试剂盒做，较为复杂！