【求助】乳腺癌细胞株SKBR3细胞的冻存方法...

【求助】乳腺癌细胞株SKBR3细胞的冻存方法

今天听同学说冻存液不能现配现用，因为DMSO和FBS加在一起要产热。不知是不是这样子？我复苏后培养液中有很多颗粒，因为都漂浮着，我也没分清楚这种颗粒似的东西自己会不会动，反正只有极少极少细胞贴壁，大多数没多久自己就碎了。这种颗粒通过换液就可以减少到几乎没有，所以我觉得不像是污染。怎么都没人回帖呢？是我说得不够清楚，还是真的很少人养过这株细胞？急切盼望您的指导，谢谢！

血清9：DMSO 1，最简单的冻存方法，但是要温度逐渐降低。

我们实验室达不到这种要求。只能4度—-20度— -80度。

hudingrong
我们实验室达不到这种要求。只能4度—-20度— -80度。

这样冻应该也没问题，原来我们也这么冻过，没问题的，不过我们-80度后放入液氮中。如果复苏没有活细胞，再排除了复苏方法错误后，要看看当时冻存时细胞状态怎么样，有些细胞在冻存时状态已经不好了，这样复苏的存活率必然很低

细胞冻存时状态很好。不过我后来用冻细胞剩的一点DMSO做MTT，结果不行，加进去后没变色。但是DMSO那种难闻的味道还是没变。不知道有没有可能是DMSO的影响。我是避光常温保存的。