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l小呆
现在准备构建两株细胞的稳转细胞系，进行了一点实验，其中一株细胞在筛选过程中几乎都死光了，另一株目前还好，有几个问题想请教一下园子里的高手，还请给位给点建议。
G418浓度之前师兄已经摸索出来，这次筛选直接用师兄浓度。
1、6孔板转染后多长时间开始进行G418筛选？
2、G418筛选是在6孔板中继续筛选还是转到24/96孔？大皿？
3、G418浓度什么时候减量
4、？筛选过程中荧光观察一小部分克隆不错，如何挑选出来？
5、整个筛选过程大约需要多长时间？
lipo3000筛选
谢谢大家！
......
1 转染后48-72小时筛选
2 大皿好挑单克隆，但我们以前用瓶子筛 不容易污染
3 挑出阳性克隆前 不减量量你要做个梯度筛选啊！
4 用枪头或者灭菌后牙签
5 技术成熟的话 1-2个月左右你也可以做有限稀释法 就不需要挑！ 当然做慢病毒最快只要1周就搞定！
已解决
