收藏  |   举报 2016-10-24 22:42   关注:223   回答:6

为什么提取的原代细胞总是污染...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-14 04:12
为什么提取的原代细胞总是污染
举报 2016-10-25 13:45

实验器诫比如剪刀啥的可以高压下。

我们这个做原代的都是泡玩酒精后都高压一遍在用的

举报 2016-11-01 14:10

建议你直接买细胞做实验,这样更加节约时间,专业人做专业事。

举报 2016-10-26 12:14
东月来星

实验器诫比如剪刀啥的可以高压下。

我们这个做原代的都是泡玩酒精后都高压一遍在用的


器械用完做完也高压的,反正还是总污染

举报 2016-11-02 03:36

展开引用

zhouyuzhengjj

各位大神,求指导,我最近在提取大鼠原代肝星状细胞,因为实验室地方比较小,在细胞房的缓冲间操作,也是按一般的步骤,先消毒,备皮,开腹,然后门静脉穿刺进行灌注,灌注的时间大概接近一个小时,实验用的器械也都用酒精泡一整夜才用,灌注结束后剪下肝脏,放入烧杯中消化震荡半小时,之后离心。整个操作的过程也很小心,用的东西也都高压灭菌过,但是每次提取的细胞刚开始还好,放几天就出现污染,孵箱里面的空培养液体镜下观察却没有问题,到底是哪里出了问题,求教


......


我建议你取组织的时候,把老鼠杀死以后,后面的步骤都在超净台里面完成,这样污染的机率小一些。
举报 2016-11-01 03:53

是不是培养箱内污染了?楼主问题解决了吗?我最近也在做原代细胞,实验室也有其他人做原代细胞,但是都以失败告终,都是因为培养过程中细胞污染了。

举报 2016-11-05 07:04

我在实验室在取原代细胞的时候 所有的仪器 工具 耗材灭菌是必须的但我一般会加少量的Gibico双抗和ChanGEnome支原体预防剂 毕竟做不到完全无菌啊

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