肿瘤干细胞培养液可以加双抗么？...

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如题，想直接从原代肿瘤细胞中筛选干细胞，用的无血清未加双抗的培养基，做了三次，都污染了，都是第二天去看培养基就黄掉了，以前做过肿瘤细胞，都没有这种情况，肿瘤细胞培养液有加双抗，因此想问下干细胞培养液可以加双抗么？以及有没有小伙伴做过直接培养原代肿瘤干细胞的，指导指导哇。

......

可以加，但是尽量还是不要加吧。要看你的细胞来源，还有培养基是不是已经不行了，或是培养环境。

当然，加双抗是最保险的，但是也不能完全避免。是什么污染清楚么

七更七子石

可以加，但是尽量还是不要加吧。要看你的细胞来源，还有培养基是不是已经不行了，或是培养环境。

当然，加双抗是最保险的，但是也不能完全避免。是什么污染清楚么

我的是结肠肿瘤组织，上两次都是培养基很快就变黄了，应该是细菌污染，这次用了加双抗的培养基，早上去看的时候培养基颜色正常，打算养一段时间后就把双抗去掉。能不加还是不加好。对了，我用胶原酶处理的原代肿瘤细胞，需要直接筛选肿瘤干细胞，即使过滤了也还是有细胞团或组织团，肉眼已经看不见了，显微镜下可观察

，请问如何去除它们，你有没有什么好的方法，求赐教。

医心如泉

可以的吧，做原代时，我PBS里都加双抗了

谢谢，请问您做的是什么原代？

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谢谢，请问您做的是什么原代？

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我的是结肠肿瘤组织，上两次都是培养基很快就变黄了，应该是细菌污染，这次用了加双抗的培养基，早上去看的时候培养基颜色正常，打算养一段时间后就把双抗去掉。能不加还是不加好。对了，我用胶原酶处理的原代肿瘤细胞，需要直接筛选肿瘤干细胞，即使过滤了也还是有细胞团或组织团，肉眼已经看不见了，显微镜下可观察

，请问如何去除它们，你有没有什么好的方法，求赐教。

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结肠癌之前我也做过，这个是重度污染的，我都是用高浓度P/S去清洗的，培养的时候必须加双抗。当然，如果不想用抗体的话可以通过流式sorting，也可以用生物净化。流式比较快，而且挺方便的，生物净化周期比较长，成功率还不太高。

七更七子石

结肠癌之前我也做过，这个是重度污染的，我都是用高浓度P/S去清洗的，培养的时候必须加双抗。当然，如果不想用抗体的话可以通过流式sorting，也可以用生物净化。流式比较快，而且挺方便的，生物净化周期比较长，成功率还不太高。

可是过流式得把细胞消化成单个细胞，可我目前的酶不能完全把组织消化成单个细胞，这样会堵流式得柱子。请问您是怎么克服的呢？还有能不能把您当初做结肠癌的过程发我下，我想看看是哪一步污染了，昨天做的今晚去看又黄了，还有您去医院取组织是怎么取的。我感觉总这个方法污染太大了。组织在外爆率时间太长了。

医心如泉

小鼠骨髓 脾脏 做免疫细胞

有么有做过人的啊？我的最近老污染，心累

dxy_h2lc4whq

有么有做过人的啊？我的最近老污染，心累