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如何利用慢病毒载体构建稳定表达外源基因的细胞系不...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-22 15:50
如何利用慢病毒载体构建稳定表达外源基因的细胞系不
举报 2017-10-10 10:15
真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体,在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。 腺病毒载体携带外源基因较大,可瞬时高表达。 慢病毒载体携带外源基因较小些,但可以重组入细胞基因组,稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法
6.获得稳转株
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