【整理总结】李晶教授提供：细胞冻存、解冻方法与细胞计数(虽基...

【整理总结】李晶教授提供：细胞冻存、解冻方法与细胞计数(虽基础，但重要)[精华]

现在细胞的冻存很简单，不像楼主说的那么麻烦，我说一下我现在所用的细胞冻存方法，甚是简单，而且冻存的效果很好！取生长良好细胞消化后，用血清悬浮细胞，然后缓慢加入10%DMSO，混匀，每管细胞数为3*10^6个，每管1ml即可，然后放入细胞冻存盒(很多公司都有卖的)，置于-80度冰箱过夜，第二天就可以转入液氮中，这个方法百试不爽！

我还有更简单的方法，其实肿瘤细胞系没有那么娇气。我所用的方法如下：配置2*的冻存液。消化细胞后离心收集细胞，然后调整细胞密度，一般是25cm2的瓶子能动村2管左右（1.5-1.5ml/管），标记好之后，用纱布包裹好，然后将其放在液氮上方，注意不要接触液氮，一般是放在液氮罐盖上，这样放置大约45min左右，随后可以放入液氮中长期保存。效果不错的哟。

很好。谢谢！我前几天冻的肿瘤细胞在－20℃放了2小时(好多资料上写的），不知道效果如何，解冻后不会都死掉吧？!

我今天冻的肿瘤细胞在－20℃放了2小时(教授让的），不知效果如何呢。

-20度是危险温区，放置一般不要超过两个小时。不过有次我把细胞忘在了-20度放了一通宵，解冻后存活率还比较高。

细胞计数
说起来容器，数起来眼花

看一下

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教授：
您好，请问配好的2倍浓度的细胞冻存液在4度下可以存放多长时间啊？一个礼拜？2个礼拜？

本帖解密，xiyongyi 战友可以发新帖求助。

细胞冻存液在4度下我放过5天，发现对我的细胞可行！更长时间的没试过。