收藏  |   举报 2018-01-22 16:02   关注:269   回答:5

混合淋巴细胞培养(MLR)的细胞增殖问题...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-21 20:47
混合淋巴细胞培养(MLR)的细胞增殖问题
举报 2018-01-27 04:40

这是培养3天后的镜下情况,因为是用手机拍的不太清楚,如果无法判断的话请大神们无视


(以上分别为2:1,5:1,10:1混合培养组)

举报 2018-01-29 20:20
大家一起谈论一下,我不是很懂,也是新手
举报 2018-01-30 00:53

我目前也在做MLR,只是我的细胞来源是人的PBMC,从你第二张图来看,CFSE阳性的细胞群是有的,CFSE阴性或者弱阳性的群也是有的,但是第三幅图CFSE+的峰不明显,CFSE-的峰很明显,感觉这有点奇怪,而且我们做的流式图,增殖也很明显,CFSE-和CFSE+的峰都很明显,应该是增殖了,但是你阴性对照也增殖,我没做过,所以不好说,建议你染个7AAD,区分下死活细胞,然后重复实验看看

举报 2018-01-28 01:11

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花花zmm

我目前也在做MLR,只是我的细胞来源是人的PBMC,从你第二张图来看,CFSE阳性的细胞群是有的,CFSE阴性或者弱阳性的群也是有的,但是第三幅图CFSE+的峰不明显,CFSE-的峰很明显,感觉这有点奇怪,而且我们做的流式图,增殖也很明显,CFSE-和CFSE+的峰都很明显,应该是增殖了,但是你阴性对照也增殖,我没做过,所以不好说,建议你染个7AAD,区分下死活细胞,然后重复实验看看

......

非常感谢你的回复和建议,我们也想染7AAD验证下细胞活性,另外想请问下你们mlr是否不加细胞刺激因子也可以获得明显的增殖结果?

举报 2018-01-24 05:06

是,我们都没有加任何细胞因子,只是用的15%的FBS+1640培养,增殖很明显

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