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收藏  |   举报 2017-02-09 13:33   关注：215   回答：11

EDC活化微球后超声，微球与缓冲液分成...

已解决 悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-22 11:26
EDC活化微球后超声，微球与缓冲液分成
举报 2017-02-16 03:13

在线等，有同行交流一下不。
举报 2017-02-14 17:41

超声5分钟也太久了吧，微球都聚集了，还有用MES缓冲液比较好
举报 2017-02-21 00:45

加入抗体后，室温孵育3小时，离心后测上清液，抗体包被量能达到0.5mg/ml，可是测试校准品没反应。很是郁闷，快崩溃了。
举报 2017-02-18 01:51

微球聚集后一般是浮在上面的，猜测可能是超声功率不够没超开的缘故
举报 2017-02-14 04:51
超生有分散微球的功能，但是实验过程中不需要超声5min这么长时间会起到反作用的，一般超声十秒就能达到分散的作用了
举报 2017-02-16 17:29

标记时候用的缓冲液有点问题吧，很多公司的微球不能有磷酸盐体系的，而且50mM的PBS离子浓度也太高了。

这个肯定有聚集了

还有EDC的量也是很容易导致聚集的
举报 2017-02-09 16:22
同意前面的说法，建议试一下一步法包被，EDC活化30分钟后直接加入抗体反应。偶联完成后再离心清洗。超声是需要对粒径检测的情况下适当进行，超到粒径均一即可。
举报 2017-02-13 11:10

5分钟？是不是都要发热了啊，抗体都要失活了
举报 2017-02-18 18:44

我是1min超声分散的
举报 2017-02-13 07:42

应该不是超声问题，你换个缓冲液，比如用100MM MES，还有看看是不是EDC加多了
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