【求助】菌体破碎...

【求助】菌体破碎

GST蛋白纯化得率低，我觉得一般问题不会出现核酸什么的上。
就我做过的纯化，我觉得有几个注意点：一是蛋白本身，最好不是包含体形式表达，要不然上清中本来蛋白就少。二是结合有两种方式，一是过柱子，二是将微珠和上清在4度混匀一小时，再自填装，效果要好很多很多，吸附更好。三是谷胱甘肽洗脱时，ph特别重要，需要在ph8.0时，谷胱甘肽活性才最好，最后一步最容易忽略，我建议你检查是否谷胱甘肽将蛋白完全洗脱下来了。

这个问题我考虑过，但是请问如何检测蛋白是否完全洗脱下来哪？

最后如果是用NaOH清洗柱子，可以看看清洗液里有没有
如果是自装柱，可以吸点点微珠加loading煮沸，跑page考染了再看

谢谢!