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【求助】有那位前辈用过clontech公司的SMART技术构...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-27 16:44
【求助】有那位前辈用过clontech公司的SMART技术构建过cDNA文库
举报 2006-03-26 21:17
我们曾做过cDNA文库构建,建议最好还是提mRNA来做比较可靠,总RNA中mRNA的比例很小,所以cDNA的量也可能少的多,而且还有rRNA的干扰
举报 2006-03-25 22:21
我的结果也和你一样,真不知道该怎么办了啊,现在我已经做了3次LD-PCR了,但是什么都没有,试剂盒的东西这么少,我该怎么办啊,请问你作出了吗,有什么好的建议吗
举报 2006-04-04 22:59
我也准备用这个做,不过还没有开始。
想请教一下楼上的几位,你们第一链合成的时候做平行试验了么,不做可不可以啊,那个反转录酶只有5ul,这么一做就剩不多了。
举报 2006-03-26 05:30
建议直接交给公司做!
ps:考虑清楚是不是有必要建库。
举报 2006-03-29 01:34
可以试试 Gateway 技术建库
举报 2006-03-26 17:54
可是我们已经买了这种试剂盒,总要做下去吧?难道是试剂盒有问题,唉,clontech !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
举报 2006-03-29 13:46
西安交通大学学报(医学版) , 编辑部邮箱 2004年 03期
人正常肾组织全长cDNA文库的构建及鉴定
举报 2006-04-02 00:09
首先我觉得RNA提的不是很好
再次我觉得用mRNA比较好,试剂盒上也要求用mRNA吧,
我们用的是taKaRA的试剂盒
举报 2006-03-26 23:46
我也遇到跟楼主一样的问题,LD PCR后电泳什么都没有,真晕!就那么5微升的酶怎么敢随便折腾啊。试剂盒上好像是说提了mRNA用的是Primer Extention法,提总RNA就是用LD PCR法。不知楼主后来是怎么解决问题的,盼赐教!
举报 2006-03-29 23:23
我也买了,还没敢下手.
请问一下过柱子时用的xylene cyanol dye 在那买的
谢谢
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