怎样构建RNA干扰载体 求具体的答案 谢谢...

怎样构建RNA干扰载体 求具体的答案 谢谢

1 确定基因中同源性小的片段做干扰载体的目的片段，防止干扰到材料中含有的其他同源基因；
2 确定干扰载体中可以用的2个酶切位点，
3 设计2对带有不同酶切位点的引物，分别扩增正、反向片段，并检查序列是否正确没有突变；
4 将正向片段连接到酶切过的干扰载体中，pcr鉴定；
5 再将反向片段连上去，pcr鉴定。