构建基因敲除载体时，为什么Southern检测用的探针要设计...

构建基因敲除载体时，为什么Southern检测用的探针要设计在同源臂的外侧？

探针只有设计在同源臂外侧才能区分同源重组和非同源重组事件。如果探针在载体内，则对所有随机整合的位点都是杂交阳性。一般，在探针远离同源臂的一侧和同源臂内（或打靶载体内）需有相同的酶切的位点，这样，在双酶切（或多酶切)后，含有探针位点的片段，其大小和数量在同源重组和随机整合事件之间是不同的，故可判断是否发生了定点整合。

JianH ：

能否提供相关的Southern图片，我还是有点搞不懂！或者相关的文献也行啊！谢谢了！