举报
2017-08-05 03:22
构建载体可以丢给我~~~然后可以通过转染载体或者病毒感染的方式,导入你的sh或者过表达,然后用qPCR以及WB分别验证ran水平的干扰效率及蛋白水平的敲降效率。需要注意的是,RNA下降蛋白不一定100%下降。因为最终功能体是蛋白,因此我建议你做WB。如果后续处理时间较长,或者感染效率较低,建议你挑稳转株。如果后续处理时间很短(几天)并且感染效率很高(>80-90%)那就不需要稳转株,直接用这个细胞池就可以。有神马问题可以站短我qq。 |
举报
2017-07-25 16:54
王芳媛1991 ...... 收到病毒之后感染细胞,感染3-4天收集细胞,进行QPCR检测,挑选干扰效率最高的那个,一般在(70以上),而后使用这个病毒进行实验,在这个同时可以筛选稳定株。过表达感染细胞之后同样操作,检测可以使用QPCR检测或者标签抗体检测,一般QPCR倍数两倍以上。 |
举报
2017-07-28 14:22
分享你一份干货资料:慢病毒生产及使用操作手册 |