关于二代测序上机定量方面的几个问题...

我们一般不用qPCR定量，但是我们会进行样品的合并后Qubit定量，杂交，在定量。上机

mssy827

我们一般不用qPCR定量，但是我们会进行样品的合并后Qubit定量，杂交，在定量。上机

请问你们是如何混合样品，等体积？等质量？

一条Lane大概是30-50样本，每条Lane有总量，除以Qubit定完的量，就是每个样本需要合并的量

你的Qubit是用HS/BR?

mssy827

一条Lane大概是30-50样本，每条Lane有总量，除以Qubit定完的量，就是每个样本需要合并的量

我用的是nextseq500 只有一条Lane，我们一般用中通量的盒子，大概在32G，你指的除以Qubit定完的量我没太明白，是怎样去换算的？另外我也不太明白HS/BR是什么意思

例如：一个样本BR定完量是22.79，我需要总量是6微克，每个样本是40微升，6/(22.79*40)

mssy827

例如：一个样本BR定完量是22.79，我需要总量是6微克，每个样本是40微升，6/(22.79*40)

你们分给每个样本的数据量的比例是按照微克这种单位去混合的么？我看别人都是用的摩尔去混合的啊