合成单克隆抗体需要哪些实验材料及试剂...

合成单克隆抗体需要哪些实验材料及试剂

1.蛋白A-Sepharose置于Tris缓冲液（超50倍量v/v）充溶胀室温其灌入直径2.5 cm 玻璃层析柱用Tris缓冲液使其平衡

2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测

3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4

4.采用ELISA检测抗原特异性MAb

5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃