什么是感染性克隆？...

什么是感染性克隆？

RNA病毒感染性克隆技术是利用病毒感染性cDNA克隆研究RNA病毒结构与功能的一项新技术，包括病毒基因组全长cDNA克隆构建和病毒RNA的感染性转录体制备及导入。该技术的发展实现了对RNA病毒在分子水平上的操作，为RNA病毒基因组的结构和功能研究提供了有效的方法。
1981年，Racaniello和Baltimore将包含脊髓灰质炎病毒全长cDNA的质粒DNA转染宿主细胞，成功地构建了首个RNA病毒的全长cDNA克隆。获得cDNA感染性克隆后，可以在DNA水平上通过突变、插入、缺失和互补等手段研究RNA病毒的基因复制、表达、重组及RNA病毒与宿主的相互作用等。目前，该技术得到了广泛发展和应用，许多RNA病毒的感染性克隆已获得，并已非常广泛地应用于RNA病毒结构功能、致病机制的研究及载体与疫苗研发等。

一种制备DNA的多步骤方法，其中将一种下列DNA克隆入细菌人工染色体(BAC)中： (a)包含全长拷贝RNA病毒基因组RNA(gRNA)的DNA；或者 (b)包含RNA病毒的一个或多个gRNA片段的DNA，所述片段编码RNA依赖性RNA聚合酶和至少一种结构蛋白或非结构蛋白；或者 (c)与(a)或(b)序列的同源性至少为60％的DNA。