收藏  |   举报 2006-11-22 14:12   关注:223   回答:7

急急急急急急!!!克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-27 17:24
急急急急急急!!!克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行吗?
举报 2006-11-25 21:52
不错啊!将180bp克隆测序,序列在ncbi上blast比对一下,看是否你的目的基因,再作下一步的3‘RACE和5’RACE,即可获得全长基因。
举报 2006-11-26 17:40
180bp可能在蓝白斑筛选时会出错,片段过小,有可能找不到白斑了。
举报 2006-11-28 09:52
只提醒一个问题:多切几管多回收,越多越好。
举报 2006-11-22 22:51
谢谢各位!我试一试!~
举报 2006-12-01 10:24
180bp的基因还需要克隆吗?直接合成就行了,或者自己拿3,4条引物相互进行PCR反应即得结果,屡试屡爽。
举报 2006-11-25 10:39
兼并引物来克隆未知基因片断、再做全基因克隆。未知基因序列如何合成?
敬请指教!先谢谢了!
举报 2006-12-02 13:28
bentz
180bp的基因还需要克隆吗?直接合成就行了,或者自己拿3,4条引物相互进行PCR反应即得结果,屡试屡爽。

180bp只是基因中的一部分,他要做的是预测与克隆基因,如果都不知道基因的序列,如何去合成啊?
根据其他物种的同源性,用兼并引物拉出180bp序列,然后在中间设计一条上游引物,并做3’race,已经是比较常规的方法了。
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