【求助】如何克隆基因的全长编码序列...

【求助】如何克隆基因的全长编码序列

1.上NCBI网站差该基因的cDNA序列，当然还有物种区别，比如你要克隆人的基因，就查人的该基因的cDNA序列，
2.然后设计该基因的上下游引物。
3.提取该种组织的RNA，可用Trizol法
4.反转录成cDNA，
5.利用反转录的cDNA为模板，PCR扩增目的基因，
6.将其克隆到载体上。
大致思路是这样的，当然，还有很多细节，遇上再说。
还是在NCBI网站上有。

我也做的和你的差不多，也是要克隆一个基因，请问扩增出来的怎么知道是全长呢？而且怎么知道克隆的就是你想要的东西？