基因克隆的基本步骤有哪些...

基因克隆的基本步骤有哪些

选择目基,并设计相应引物；
　　用引物PCR扩增目基片段；
　　选择合适（抗性标记、酶切位点等）克隆载体（保真扩增）,并PCR片段连接入克隆载体；（般用Taq酶PCR产物末尾自带A,Solution 1作用与两端各带T线性T载体直接相连）
　　连接产物转化入受态肠杆菌,使含抗素培养基扩增；
　　肠杆菌提取质粒（即前面连接产物）,酶切鉴定测序鉴定均误目基片段切并与新表达载体连接,再转化入肠杆菌扩增,再提质粒,即想要目基片段克隆.