请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆？...

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请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆？

举报 2003-11-12 00:23

再详细一点吧，否则很难帮到你的！我的专业里BMP2指骨形态发生蛋白2，再说了抗凋亡基因的knockdown效应应该是凋亡呀，做梯度转染观察凋亡就可以了，筛稳定克隆做什么？非要做的话，就用诱导型RNAi表达载体，可以在诱导前筛稳定克隆。

举报 2003-11-09 02:54

多谢liven老师！

其实我不做BMP2，文献上说它是TGF-B超家族的成员之一，与细胞凋亡有关。
筛选稳定克隆我想看看它与其它基因或蛋白的关系。
请问什么是诱导型RNAi表达载体？
谢谢！

举报 2003-11-03 20:35

好像现在有Tet On型的RNAi载体，用GOOGLE查查看！

举报 2003-11-05 06:49

sunyy1976
我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！

谢谢！

能否提供该文,学习学习!!

举报 2003-11-01 09:53

我不会上传文章，就先发送到victoh的信箱。
不好意思，我写得有错误，不是用的antsense,是转染的点突变的BMP2的质粒。

举报 2003-11-07 18:49

收到了,谢谢!
可以帮你上传吗?

举报 2003-11-11 20:45

可以，谢谢！
liven老师，我听说tet挺难做的，我想问一下哪个公司的siRNA 表达载体比较好用，转染哺乳动物细胞的。谢谢！

举报 2003-11-06 20:20

sunyy1976
可以，谢谢!

BMP1B apoptosis.part1.rar(390.63k)

举报 2003-11-06 19:34

2Pt2

BMP1B apoptosis.part2.rar(296.63k)

举报 2003-11-08 18:27

Tet on 的Pol III的表达载体出现于2000年的human gene therapy，去年又出现了几篇文献，难道大家都没有注意吗？使用PolII启动子可以达到组织特异性，已经有文献报道使用Pol II启动子引导siRNA表达获得了满意的结果。

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