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2017-12-02 19:10
好高兴回答你的问题.一般来讲,1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷; 2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和); 3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀. 4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期. 5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;再总结一句,一般细胞在-80℃存放半年左右,在液氮里可以放置更长时间. 希哦.
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