求助如何避免提动物组织蛋白质研磨过程中起泡...

再次加入少量的PMSF泡泡会少很多

我想问一下 你用这个电动研磨器不会产热比较多吗 效果可以吗 我也想提组织蛋白 不敢用电动组织研磨器呢

@早孕有反应早孕兄弟你好，我觉得你担心的很有道理，怕是电动研磨器在研磨的过程中产热，影响蛋白。

之前用过钢珠的研磨仪，时间很快的，一般1-2min吧，所以产热也不会很多啊，我们用之前还把固定EP管的器材提前放进-80℃冻了一下下，就几分钟，不敢冻太久，反正磨好了没什么温度，起泡的，没管，打磨过程必然会起泡吧，静置之后，选了一些没磨好的继续磨，然后就把打磨液吸出来就算好了。

早孕有反应

我想问一下 你用这个电动研磨器不会产热比较多吗 效果可以吗 我也想提组织蛋白 不敢用电动组织研磨器呢

还可以，能提出蛋白的

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claire樱奈

动物组织块冻存在液氮，取出后放到1.5mlEP管中，EP管中加入RIPA裂解液（按照0.1mg组织最多1ml裂解液的体积使用，用前已加入PMSF），使用电动组织研磨器研磨，每次研磨时间10秒左右，研磨过程中发现蛋白质起泡，就像做蛋糕时鸡蛋被打出泡一样。请问如何避免这种情况？

PS，本来试着在冰上操作，但是电动组织研磨器工作时EP管震动的很厉害，没法放在冰上。

......

朗朗健康

前辈您好，我也刚准备组织提蛋白，用正常组织预实验出现类似您提到过的情况，最后您怎么处理呢？

同问～你们提取组织蛋白的时候是直接加裂解液然后匀浆 离心 抽上清么？有没有超声之类的步骤啊？