【经验】实验室生物安全柜操作程序...

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volab2014
1、目的：确保的生物安全柜能正确、正常的使用，确保使用生物安全柜的工作人员的健康及相应的样本及试剂不受污染。
2、范围：细菌室及值班工作人员
3、职责：
3．1细菌室工作人员：应指导教育科室人员正确使用及维护生物安全柜
3．2操作人员：应对所使用的生物安全柜的正确使用及维护进行有效监督。
4、定义：无
5、流程图：无
6、流程说明：
6．1生物安全柜的位置应当远离人员、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。
6．2 在生物安全柜的后面以及每一个侧面都应该留有30cm的空间以便于对生物安全柜的维护。
6．3 生物安全柜上面应该留有30~35cm的空间以便于准确测量空气通过排风过滤器的速度，并便于排风过滤器的更换。
6．4 工作人员在将手臂移动进出生物安全柜时，必须注意维持前面开口处的气流的完整性，手臂的移动应当尽可能慢，且和前面的开口垂直。
6．5 对生物安全柜里的物质进行操作必须在将手放进去1分钟后进行，这样可调整安全柜内通过手臂表面的空气。在开始操作前，要将所有必需的物品置于安全柜内，以尽量减少手臂进出前面开口的次数。
6．6 II级生物安全柜前面的进气格栅不能被纸、器具和其他物品阻挡。
6．7 放入安全柜内的物品必须经过70%的酒精清除表面的污染。
6．8可以在采用浸满消毒剂的毛巾上进行实验，以吸收可能溅出的液滴。
6．9 所有物品应当尽可能放在安全柜工作台后部靠近工作台的后缘的位置，并使其在操作中不会阻挡后部格栅。
6．10 易产生气溶胶的设备（如混匀器、离心机）应当放在安全柜的后部。体积较大的物品如生物危害性的废物袋，盛废弃移液管的盘子及负压吸引器，应当放在安全柜内的某一侧。在工作台面的实验操作应按照从清洁区到污染区域的方向进行。
6．11 耐高压灭菌的生物危害性废物袋和搜集移液管的盘子不应当放在安全柜外面。否则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会破坏安全柜内的空气屏障的完整性，从而影响对人员和物品的防护。
6．12 安全柜必须在工作时提前5分钟开放，在工作结束后也应当开放一会便于净化，即开放一段时间以便于污染空气流出安全柜外。
6．13 生物安全柜的维修工作必须由有经验的技术人员进行。使用生物安全柜的任何不当操作时均应当管理层报告，且在再次使用前必须先进行维修。
6．14生物安全柜中不需要紫外灯。如果用的话，就必须每周清洗以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。
6．15当安全柜重新认证时，必须检查紫外灯的强度以确保紫外灯发射的光量合适。当工作时必须关掉紫外灯，以保护眼睛和皮肤免受紫外线的损害。
6．16在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应当避免使用明火。因为明火会对气流产生影响，且在处理挥发性物品、易燃性物质时也易造成危险。
6．17若要对微生物接种环进行杀菌，应该用小型燃烧炉或电炉，而不使用明火。
6．18 若生物安全柜内出现生物危险性溅出液，应在安全柜处于工作状态下立即进行处理。要使用有效的消毒剂，并在处理过程中尽呆能的减少气溶胶的产生。所有与溅出液物品的材料都应当消毒和/或高压灭菌。
6．18在安装时以及每隔一定时间以后，应由有资质的专业人员按照生产商的说明，对每台生物安全柜的运行性能和完整性进行认证，以检查其是否符合国家或国际标准。
6．19．由于剩余的培养液及其它样品很容易滋生细菌，因此生物安全柜内的所有物品，包括设备，其表面在用完后都必须清除表面污染，并移出安全柜。在每次使用前后，生物安全柜的内表面均要清除污染。
6．20工作台表面和后壁应当用消毒剂擦洗，所用的消毒剂要能够杀死安全柜内可能发现的任何微生物。在每天工作结束后，应当擦拭生物安全柜的工作台表面、四周以及玻璃的内外侧等部位来清除表面的污染。
6．21 在对目标生物体有效时，可以采用漂白剂溶液或70%酒精来消毒。在使用腐蚀性消毒剂如漂白粉时，还必须用无菌水再次进行擦洗。
6．22建议安全柜维持在运行状态。如果要关闭的话，则应在关机前至少运行5分钟以净化内部的气体。
6．23 生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须清除污染。最常用的方法是用甲醛蒸气进行熏蒸。

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