冻干的蛋白怎样才能溶解在上样buffer里？？－急！！...

冻干的蛋白怎样才能溶解在上样buffer里？？－急！！

我检索了，很多有关丙酮沉淀的，可是没有找到如何能溶解。战友们，快帮忙啊！偶都溶了一个中午了，现在也没有溶解！！

用裂解液也溶不掉?

是啊！我用丙酮沉淀，－20过夜后，离心，再用丙酮洗了两遍，洗的时候就觉得沉淀很难吹打开，洗完后我就将EP管开着盖放－20冰箱，第二天发现冻干了，白色粉末状，将其用1×SDS上样缓冲液溶，我个人觉得一点也没有溶，我敲打了一个中午，最后将EP管放在沸水里放了5分钟，感觉好像溶了一点点，就凑合着上样了，电泳的结果是，什么带也没有！快帮忙啊！

啊?
你就直接将冻成干粉的蛋白溶解到1×SDS上样缓冲溶液中?
当然很难溶解.而且蛋白的浓度也很高.蛋白溶解需要高浓度的尿素.
你可以将冻成干粉的蛋白再用裂解液裂解,然后再加1×SDS上样缓冲溶液,再上样.

尿素？裂解液裂解？可是1×SDS上样缓冲溶液不也可以当裂解液使用吗？一些实验室的裂解液就是1×SDS上样缓冲溶液，什么时候加尿素呢？？

可是你的蛋白很难溶解啊
你用裂解液试试,应该没问题

用裂解液溶解后是不是应该加2×或2×以上的上样buffer啊？

可以放在超声波清洗机超声一会，不过注意会变性的奥

claybird
我检索了，很多有关丙酮沉淀的，可是没有找到如何能溶解。战友们，快帮忙啊！偶都溶了一个中午了，现在也没有溶解！！

这是老问题。我也困扰了好久。没发现园子里有好的解决办法。
加很猛的裂解液只能溶解一部分的。
超声倒没试过。

华辰多肽
可以放在超声波清洗机超声一会，不过注意会变性的奥

偶知道细胞超声仪不会使蛋白变性，用这超超行不行？