求助！小鼠脑组织石蜡切片染色脱片...

脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

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Justin001

脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

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yan1091038778

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

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我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

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Justin001

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

您做的是大鼠吗？我脱水时间是参照《实验病理学技术图鉴》这本书，您的脱水时间和上面大鼠的脱水时间差不多。透明时间书上面大鼠加起来是2h，小鼠是8min。您做好透明后组织是全通透的还是按照时间做完后就取出组织？我的脱片原因会不会是透明时间过久？

......

小鼠的脑脱水我用的这个时间。8分钟是完全没可能把小鼠脑的水脱干净的，水没脱好，二甲苯也就进不了组织，浸蜡的时候蜡也进不了组织，没有蜡支撑组织切片也就切不出来。透明的这个时间我是摸索了一段时间的，效果不错就确定的45分钟

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Justin001

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

您做的是大鼠吗？我脱水时间是参照《实验病理学技术图鉴》这本书，您的脱水时间和上面大鼠的脱水时间差不多。透明时间书上面大鼠加起来是2h，小鼠是8min。您做好透明后组织是全通透的还是按照时间做完后就取出组织？我的脱片原因会不会是透明时间过久？

小鼠的脑脱水我用的这个时间。8分钟是完全没可能把小鼠脑的水脱干净的，水没脱好，二甲苯也就进不了组织，浸蜡的时候蜡也进不了组织，没有蜡支撑组织切片也就切不出来。透明的这个时间我是摸索了一段时间的，效果不错就确定的45分钟

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

您做的是大鼠吗？我脱水时间是参照《实验病理学技术图鉴》这本书，您的脱水时间和上面大鼠的脱水时间差不多。透明时间书上面大鼠加起来是2h，小鼠是8min。您做好透明后组织是全通透的还是按照时间做完后就取出组织？我的脱片原因会不会是透明时间过久？

小鼠的脑脱水我用的这个时间。8分钟是完全没可能把小鼠脑的水脱干净的，水没脱好，二甲苯也就进不了组织，浸蜡的时候蜡也进不了组织，没有蜡支撑组织切片也就切不出来。透明的这个时间我是摸索了一段时间的，效果不错就确定的45分钟

多谢老师指导，另外问老师两个关于细节方面的处理。一是固定好的组织要用流水冲洗很长一段时间吗（之前做是用pbs冲了一下）？二是烤片之后要冷却至室温再进行脱蜡吗（之前是从60℃烘箱拿出来装在染色架上后接着就脱蜡）？上面两个细节处理不好会是导致图上问题的原因吗

......

我的话是固定后用PBS冲洗了几次，主要是去除表面过多的固定液，再用吸水纸稍微吸一下。我是每次烤完片冷却了放一段时间再脱蜡，刚烤片，片子还没有贴上去，马上脱蜡是会容易脱片。担心脱不干净可以冷却一段时间后再放温箱的烤几分钟再去脱蜡

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脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的？个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜，80%，90%各两个小时，95%，100%各一个小时，切片厚度是5μm，没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应，组织透明效果不好的很大原因是脱水不够

求助老师，通常透明时间是多久？组织完

我用的脱水时间就是上面说的，透明我就用的二甲苯共45分钟（分两次），量要够。

您做的是大鼠吗？我脱水时间是参照《实验病理学技术图鉴》这本书，您的脱水时间和上面大鼠的脱水时间差不多。透明时间书上面大鼠加起来是2h，小鼠是8min。您做好透明后组织是全通透的还是按照时间做完后就取出组织？我的脱片原因会不会是透明时间过久？

小鼠的脑脱水我用的这个时间。8分钟是完全没可能把小鼠脑的水脱干净的，水没脱好，二甲苯也就进不了组织，浸蜡的时候蜡也进不了组织，没有蜡支撑组织切片也就切不出来。透明的这个时间我是摸索了一段时间的，效果不错就确定的45分钟

多谢老师指导，另外问老师两个关于细节方面的处理。一是固定好的组织要用流水冲洗很长一段时间吗（之前做是用pbs冲了一下）？二是烤片之后要冷却至室温再进行脱蜡吗（之前是从60℃烘箱拿出来装在染色架上后接着就脱蜡）？上面两个细节处理不好会是导致图上问题的原因吗

我的话是固定后用PBS冲洗了几次，主要是去除表面过多的固定液，再用吸水纸稍微吸一下。我是每次烤完片冷却了放一段时间再脱蜡，刚烤片，片子还没有贴上去，马上脱蜡是会容易脱片。担心脱不干净可以冷却一段时间后再放温箱的烤几分钟再去脱蜡

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