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2009-10-17 06:41
装分子筛柱确实很恼人。看了你程序,估计存在下列可能:
1、进出口的堵头密封不严。 这个最常见。虽然你已经反复检查了,还是有可能的。 出现干柱时,看看进口管是否空了,如果没有液体充满,可能性就更大。 极端的检验方法就是,在装柱完毕后,不要用堵头封进出口,而是把进出口浸入到液体中,早上再来看是否干柱。如果还是干柱,那么才可以完全排除堵头的可能性。 2、填料和溶液的脱气 不知道你的填料清洗用的是什么方法。如果是用滤洗的话,可能胶的内部有空气残留。 溶液不经过脱气处理,过夜后也会有气体逸出。 一般首选真空抽滤脱气,溶液亦可用超声脱气。 3、分子筛装柱程序 分子筛装柱一般都有比较严格的装柱程序,最好按照填料的说明书来。S300好像至少有两段不同的流速装柱。你的缓慢加压可能不合程序要求,看看说明书吧。 柱子全部装好后,最好用使用流速冲洗柱一段时间,推荐一个柱体积以上。 4、柱子问题 在这儿绝对不是崇洋媚外,国产柱确实在有些方面大大不如进口柱。例如O型圈、柱玻璃管直径上下的均匀度、柱操作的容易度等。 一般对分子筛这种对体系要求较高的纯化柱,最好采用进口柱来装,例如XK50/100(GE)。离子交换柱、亲和层析柱用国产柱问题不大,只要你不用梯度洗脱方式。 你的干柱有可能是O型圈与玻璃管贴合得不够好。装柱时可以在柱头密封圈的上方留一段液体看看。 |
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2009-10-12 20:22
干柱现象一般是漏了,检查柱子的出口向下的所有接口是否密封
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