热门搜索： 生物  缓冲液  安  bio  试剂盒  蛋白质  显微镜  上海  TED  ELISA试剂盒 
首页 > 知道 > 仪器类 > 温控控制 > 金属浴
收藏  |   举报 2008-04-10 19:07   关注：261   回答：9

【求助】丙酮沉淀蛋白后，关于蛋白质溶解的问题。急！...

已解决 悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-03 06:29
【求助】丙酮沉淀蛋白后，关于蛋白质溶解的问题。急！
举报 2008-04-13 19:14
我也曾经遇到过这个问题。也用超声裂解过。效果不是很好。我觉得主要问题是蛋白沉淀后不用太干了，干了就很难溶解。
举报 2008-04-20 15:28
是阿，可以在沉淀刚刚形成的时候就溶解，然后要用超声超然后再离心用上清效果还好
举报 2008-04-19 18:21
我也是刚开始做，但是有点经验可以跟大家一起分享一下：）
我做完TCA丙酮沉淀后，先用水化液溶解，用枪头吹打一下，然后振荡一下，放在4度过夜，第二天看的时候沉淀基本就溶解了，然后再离心一下，取上清就可以直接用于上样了：）
举报 2008-04-17 10:55
丙酮有残留时蛋白不易溶解，可用电吹风吹干后溶解。电泳前最好离心一下，上清用于点样，未溶解的物质会造成拖尾。
举报 2008-04-21 16:45
谢谢各位的帮助！
举报 2008-04-19 21:51
直接用水化液溶，超声一下，再放在30度的金属浴中，溶的效果会很好的
举报 2008-04-14 14:36
请问什么是金属浴啊！30度的高温蛋白质不会降解吗？
举报 2008-04-18 11:23
经过有机溶剂沉淀后，有些蛋白就无法溶解了。
即使用超声，也只是形成微粒（肉眼未必看见）悬浮在溶液中。
举报 2008-04-16 12:54

我也是用丙酮沉淀的蛋白，然后用5%的SDS在65℃水浴锅中溶解的，溶解的还可以。但是有一个问题，之前用RIPA裂解液裂解的时候需要加蛋白酶抑制剂，磷酸化酶抑制剂。现在不知道怎么加这个?可以给SDS中加吗？求高手解答
网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明：本站有部分内容来自互联网，如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权，请来电或致函告之，本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。