收藏  |   举报 2009-07-30 14:43   关注:215   回答:13

【求助】为什么蛋白与上样缓冲液混合后形成沉淀,急!...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2025-01-05 15:36
【求助】为什么蛋白与上样缓冲液混合后形成沉淀,急!
举报 2009-08-05 23:50
你可以试试看,单独把SDS和KCl混起来,看看会发生什么事情
这个也是碱法提DNA的原理
举报 2009-08-01 14:26
学习!!!!!!!!!!!!
举报 2009-08-06 00:05
你可以试试看,单独把SDS和KCl混起来,看看会发生什么事情
这个也是碱法提DNA的原理

不会的,第一次预实验没有出现这种情况。
举报 2009-08-03 13:14
呵呵,并不是你的蛋白沉淀了,而是KCl与SDS发生了反应,另外硫酸铵也一样,如果想要避免这种情况,可以用其他的离子型去垢剂代替Loading buffer中的SDS,不过其必要性不大,因为就算是有沉淀了也同样可以上样,并不影响电泳。
举报 2009-07-31 15:25
呵呵,并不是你的蛋白沉淀了,而是KCl与SDS发生了反应,另外硫酸铵也一样,如果想要避免这种情况,可以用其他的离子型去垢剂代替Loading buffer中的SDS,不过其必要性不大,因为就算是有沉淀了也同样可以上样,并不影响电泳。
举报 2009-07-31 09:16
可是跑电泳是蛋白为什么很少很少了呢?
举报 2009-08-01 23:24
钾和SDS反应形成沉淀,并与蛋白共沉淀,这个是碱法提取DNA的原理,我说的你又不肯信。

这个步骤能够沉淀大部分的细菌蛋白,当然你的蛋白也没了。
举报 2009-08-06 21:29
按supermaltose提议,把SDS和KCl混起来,还真看到了沉淀,谢谢楼上各位的建议。
举报 2009-07-31 15:37
k离子浓度过高会对电泳有影响的!
举报 2009-08-03 14:34
这篇文章以前看到下载的,你看一下吧!

HOW DOES AN SDS PAGE GEL REALLY WORK .doc(28.0k)
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