【求助】共聚焦荧光染料选择问题...

【求助】共聚焦荧光染料选择问题

hho
学的很快呀．把原来的那个贴子删了吧.
你的问题我不是很熟．胡乱说几句吧．首先你必须要有能激发你所需要的三种颜色的显微镜．然后在同一视野下把3种颜色各拍一张照片（数码的），保存好，利用photoshop的叠加功能可以把3张照片合为一张就可以啦.
请高手拍砖.

目前我所接触的激光共聚焦都没有紫外激发光，所以不能激发DAPI。

应用激光扫描共聚焦显微镜操作系统的Ar/GHeNe双通道激光系统，同时扫描FITC标记的阳性反应物和Cy3标记的阳性反应物。扫描选用的参数为：激发光波长为488nm和554nm，观测光分别为518nm和575nm，物镜为40倍，扫描方式为点扫描，Zoom为（1.0）。经Lasersharp 2000软件（ 4.5.3 ）摄像,分析。共聚焦会自动扫描出三章图片（两张单染，一张合成）。
效果很好。

hoho
我很聪明的，还要叠加呀？我不能用一个...么，我看到ZEISS上有的是这样的，488/513/560，比如呀，我记不得，是什么意思呢，是不是如果我找到3种染料激发光分别是488，513，560的话，就可以同时看到3种颜色，另外，双光子是怎么回事？为什么说他可以解决紫外激发的问题？救命呀，我什么都不会，也没有镜子，怎么办？哭！

那就是说我做不了细胞核了，我要做的事染色体在细胞核中的定位，如果然不了细胞核，我怎么分析呢？为什么很多国外的文章都能做呢，就是用ZEISS510，郁闷亚？